Что такое ПЦР плюсы и минусы PCR

Что такое ПЦР плюсы и минусы PCR

Молекулярная (ДНК/РНК) диагностика методом ПЦР (кровь)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов.

ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами.

Т.ж. этот метод диагностики позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования). Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы.

  • Описание
  • Стоимость услуг
  • Наименование услуги
  • Цена
  • Срок
  • Выбор
  • ДНК вируса герпеса VI типа (Human herpes virus, HHV) (кровь)
  • Определение ДНК вируса простого герпеса 1 и 2 типов (Herpes simplex virus types 1, 2) методом ПЦР в крови, качественное исследование
  • Молекулярно-биологическое исследование крови на вирус Эпштейна-Барра (Epstein — Barr virus)
  • Moлекулярно-биологическое исследование крови на вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1 (Human immunodeficiency virus HIV-1)
  • Молекулярно-генетическое исследование мутации G1691A в гене фактора V (мутация Лейдена в V факторе свертывания)
  • Определение РНК вируса гепатита D (Hepatitis D virus) в крови методом ПЦР, качественное исследование
  • Определение РНК вируса гепатита G в крови методом ПЦР
  • Определение РНК вируса гепатита A (Hepatitis A virus) в крови методом ПЦР
  • Определение ДНК вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови методом ПЦР, качественное исследование
  • Молекулярно-биологическое исследование крови на РНК вируса гепатита С (генотип 1а, 1b, 2, 3a, 4, 5a, 6), количественное исследование
  • Определение ДНК листерии (Listeria monocytogenes) методом ПЦР в крови, качественное исследование
  • Определение ДНК микобактерии туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex) в крови методом ПЦР
  • Определение ДНК токсоплазмы (Toxoplasma gondii) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови
  • Определение ДНК цитомегаловируса (Cytomegalovirus) вметодом ПЦР в периферической и пуповинной крови, количественное исследование
Для расчета стоимости, выберите нужную услугу
  • Аллергены
  • Анализы для госпитализации (стационар)
  • Биохимические исследования
  • Волчаночный антикоагулянт
  • Гемостазиограмма
  • Генетические исследования
  • Гормональные исследования
  • Изосерологические исследования (Группы крови и резус-фактор)
  • Иммунологические исследования
  • Клинические анализы
  • Маркеры аутоиммунных заболеваний
  • Маркеры инфекционных заболеваний
  • Микробиологические исследования
  • Молекулярная (ДНК/РНК) диагностика методом ПЦР (кровь)
  • Молекулярная (ДНК/РНК) диагностика методом ПЦР (соскоб)
  • Онкомаркеры
  • Цитологичекие исследования
  • Экспресс-анализы

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов.

ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

Читайте также:  Последствия сотрясения головного мозга

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами.

Т.ж. этот метод диагностики позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования). Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы.

Лабораторное проведение ПЦР-анализа: основные этапы

Анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция) – метод диагностики высокой точности, который позволяет выявлять разные виды инфекции. Для этого в лабораторных условиях проводится исследование генетического материала (слюны, мокроты, крови, выделений из половых органов и других биологических материалов).

На первоначальном этапе проведения ПЦР-анализа производится забор материала для исследования. При этом должны быть соблюдены правила: обеспечение полной стерильности, использование исключительно одноразовых материалов.

После забора биоматериал при помощи щеточки помещается в контейнер с физраствором. Лабораторное исследование взятых проб должно быть выполнено как можно быстрее после забора.

ПЦР-анализ ДНК в лаборатории включает три этапа:

  • выделение;
  • ампликация фрагментов;
  • детекция продуктов ампликации.

Когда врач выполнил забор биоматериала у пациента и провел его специальную обработку, двойная спираль ДНК расщепляется на отдельные нити. При добавлении специальной жидкости в биоматериал, растворяются органические вещества, которые мешают «чистоте» реакции. Как следствие, после устранения липидов, аминокислот, пептидов, углеводов, белков, полисахаридов, образуются ДНК либо РНК.

Время, которое требуется на выделение ДНК, зависит от вида возбудителя инфекции, а также биоматериала, который используется для проведения анализа. Так, к примеру, если будет исследоваться кровь, подготовительный этап занимает до двух часов.

Для ампликации ДНК применяются специальные матрицы. Чтобы провести данный этап, вполне достаточно небольшого кусочка ДНК, который характерный только для конкретной инфекции.

Ампликация ДНК – это многократное увеличение количества копий ДНК, которые характерны только для определенного организма. Всю цепь не обязательно достраивать, чтобы увидеть, что является возбудителем инфекции. Требуется только участок, который является характерным для конкретной бактерии.

Чтобы провести ПЦР-диагностику, используется специальное программируемое оборудование, которое автоматически меняет температуру. При проведении амплификации задается программа, которая соответствует определенной инфекции. Занимает данный этап приблизительно 2-3 часа.

Детекция продуктов асплификации подразумевает разделение смеси продуктов амплификации, которая была получена. Для этого добавляются специальные растворы, чтобы фрагменты ДНК отражались светящимися полосами оранжево-красного цвета. Это свечение показывает наличие ДНК вирусов, бактерий и микроорганизмом в биоматериале пациента, точно определяя их конкретный вид.

Читайте также:  Когда тесты показывают ложноположительные результаты - Юльма - BabyPlan

ПЦР-анализ

В зависимости от поставленной задачи, материалом для ПЦР-диагностики могут служить:

  • соскобы эпителиальных клеток (кожные покровы, слизистая уретры, цервикального канала, др.);
  • смывы с конъюнктивы и др.;
  • кровь, биологические жидкости (сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости, др.);
  • моча, мокрота,слюна, слизь и другие биологические выделения;
  • биоптаты органов.

Как правильно подготовиться к ПЦР-анализу (ДНК-диагностике)

Достоверность результатов лабораторной диагностики зависит не только от опыта и профессионализма врача-лаборанта, возможностей данной лаборатории, но и от того, соблюдал ли пациент рекомендации врача, насколько правильной была его подготовка к проведению анализа. Ничего сложного в правильной подготовке нет.

При сдаче анализа методом ПЦР врачи рекомендуют соблюдать следующие инструкции:

1. Кровь

Сдача ПЦР анализа крови проводится натощак, т.е. необходимо ничего не есть, не пить и не жевать жвачку. Забор крови проводится из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в специальную вакуумную пробирку типа Vacutainer (крышка сиреневого цвета, в качестве консерванта — ЭДТА). Запрещается использовать другие вещества в качестве антикоагулянта.

Пробирка закрывается пробкой и переворачивается несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С.

Максимальный срок хранения: при исследовании на вирусные гепатиты до 2 суток, при исследовании на другие инфекции до 5 часов (при +4°С, или 1 мес. при -20°С).

2. Моча

Для анализа отбирается первая порция утренней мочи в количестве 10-50 мл в специальный флакон или пробирку без консервирующего раствора.

Максимальный срок хранения отобранного материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С или 1 мес. при -20°С.

3. Слюна

Перед забором слюныпроизводится трехкратное полоскание полости рта физиологическим раствором. Забор слюны производится в одноразовые пробирки в количестве 3-5 мл. Материал необходимо отбирать непосредственно перед исследованием и немедленно доставлять в лабораторию. При невозможности быстрой доставки материал замораживают при -20°С. Последующая транспортировка осуществляется в замороженном виде (в термосе со льдом).

4. Мазок из ротоглотки

Мазок материала производится рабочей частью стерильного одноразового аппликатора с задней стенки глотки и крипт миндалин. После забора материала аппликатор помещают в стерильную одноразовую пробирку.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С или 1 мес. при -20°С.

5. Мокрота и плевральный выпот

Материал отбирают в специальные флаконы в количестве 5-10 мл.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С или 1 мес. при -20°С.

Читайте также:  Коричневые пятна на теле - почему появляются и чем лечить Причины и виды

6. Биопсийный материал

Материал помещают в сухую одноразовую пробирку типа Eppendorf.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С или 1 мес. при -20°С.

7. Синовиальная жидкость

Забор материала производится одноразовым шприцом в количестве 1 мл. Отобранный материал помещают в сухую одноразовую пробирку типа Eppendorf.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С или 1 мес. при -20°С.

8. Забор материала для анализа на урогенитальные инфекции

За сутки до проведения анализа не жить половой жизнью.

Не мочиться за 1-2 часа до забора материала.

У женщин забор материала производится из трех различных точек: цервикальный канал, задний свод влагалища, уретра. При необходимости материал для исследования берется из генитальных язв (исследование на HSV-I/II, Haemophilusducrei). Забор производится универсальным зондом или ложкой Фолькмана. Не допускается наличие в мазке крови или слизи.

Если соскоб взят универсальным зондом, рабочая часть зонда, содержащая исследуемый материал, отрезается или обламывается и помещается в одноразовую пробирку типа Eppendorf с консервирующим раствором (транспортной средой). Если забор материала производится ложкой Фолькмана, рабочая часть инструмента споласкивается в консервирующем растворе (транспортной среде), содержащимся в одноразовой пробирке Eppendorf.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С или 1 мес. при -20°С.

Забор материала у мужчин производится универсальным зондом или цитощеткой из уретры. Обычно перед процедурой уретру обрабатывают физраствором. При необходимости материал для исследования берется из генитальных язв.

В случае забора материала универсальным зондом, рабочая часть зонда, содержащая исследуемый материал, отрезается или обламывается и помещается в одноразовую пробирку Eppendorf с консервирующим раствором (транспортной средой). После взятия материала цитощеткой, она опускается в пробирку Eppendorf с консервирующим раствором (транспортной средой), несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Не допускается наличие в мазке крови.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при +4°С или 1 мес. при -20°С.

Сок предстательной железы после пальцевого массажа предстательной железы и в количестве 0,5-1,0 мл собирают в сухую пробирку типа Eppendorf. При невозможности получить сок, сразу после массажа собирают первую порцию мочи (в которой содержится сок предстательной железы) в количестве 10 мл (правила забора мочи смотри выше).

Срок проведения

Результат ПЦР-диагностикиобычно можно получить через 2-3 рабочих дня после сдачи анализа.

Возможно получение результатов ПЦР-теста в течение одного рабочего дня.

Ссылка на основную публикацию
Что такое панические атаки и как с ними справиться — Лайфхакер
Взрослые люди с синдромом Аспергера и панические атаки Панические атаки обычно начинаются внезапно, без предупреждения. Можно попасть под их удар...
Что такое инсулинорезистентность
Инсулинорезистентность Внешние признаки и лечение инсулинорезистентности, норма инсулина в крови, диета при инсулинорезистентности Схема рассчитана на 3-х разовое питание, с...
Что такое истинная доброта духовного человека
Что такое доброта истинная и доброта ложная? Как отличить их? Что такое доброта истинная и доброта ложная? Бывает ли такое...
Что такое перистальтика кишечника — симптомы нарушения, лечение
Нарушения моторики , MD, Perelman School of Medicine at The University of Pennsylvania Первичные причины нарушения моторики пищевода включают Нарушение...
Adblock detector