Серологическая диагностика клещевого боррелиоза и энцефалита

Серологическая диагностика клещевого боррелиоза и энцефалита

Серологические методы исследования в диагностике паразитарных заболеваний

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Серологический анализ крови представляет собой способ лабораторного исследования определенных антигенов или антител (специфических белков) в сыворотке крови пациента, основанный на иммунных реакциях организма. Данный метод применяется при диагностике инфекционных заболеваний для выявления наличия антител в крови больного к определенному виду вирусов или бактерий, а также для определения групповой принадлежности крови.

Исследуемый материал

Методика проведения анализа или забора крови

Данный анализ не требует специальной подготовки пациента. Забор крови проводится утром натощак и, производится в процедурных кабинетах лечебных учреждений, согласно общепринятым гематологическим методикам. Для серологического исследования забор крови производится двумя методами: венозную кровь забирают из локтевой вены пациента, а капиллярную кровь – из безымянного пальца. Кровь помещают в стерильные герметичные пробирки.

Особенности транспортировки крови и хранения сыворотки

Для чего используют серологические исследования?

Серологические методы лабораторной диагностики используются для выявления таких заболеваний как эхинококкоз, трихинеллёз, токсокароз, описторхоз, цистицеркоз, токсоплазмоз, амебиаз, лямблиоз, для определения эффективности проведённого курса лечения и, наконец, для обнаружения повторного заболевания после полного выздоровления пациента.

Основные методы серологической диагностики

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Данная реакция является непрямым вариантом серологического исследования, то есть, производится она в два этапа. На первом этапе производят выявление необходимого антитела в циркулирующем комплексе антиген – антитело с помощью антиглобулина, схожего по своей структуре с белками иммунной сыворотки. Выявление искомого антитела возможно также при изучении заранее приготовленного антигенного препарата под люминесцентным микроскопом, без использования антиглобулинов.

Иммунофлюоресцентная реакция – очень трудоёмкий процесс, требующий от специалиста немало времени и ответственности. Начинается реакция с подготовки растворов, затем сыворотки и их контрольные образцы подвергаются титрованию (процесс, позволяющий определить содержание определённого вещества путём постепенного смешивания исследуемого раствора с контролируемым количеством реагента). Подготовленные ранее разведения и их контрольные образцы аккуратно наносятся на предметные стёкла с антигеном. Потом препараты подвергаются инкубации, затем следует их отмывание и высушивание на воздухе. На стёкла с антигеном тонким слоем наносится антисыворотка, после этого производится вторичная инкубация препаратов и, вся предыдущая цепь действий повторяется, завершаясь высушиванием препарата. В результате препарат на предметном стекле подвергается обработке глицерином и исследуется в люминесцентном микроскопе.

Результаты проведённой реакции оцениваются по четырёх бальной шкале, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов:
+ очень слабое свечение клетки, заметное только на её периферии
++ слабое свечение периферии клетки, но с явно заметным зелёным оттенком
+++/++++ яркое свечение зелёного цвета периферии клетки
Титром реакции считается такое разведение сыворотки, где не менее 50 % клеток антигена проявляют чёткое поверхностное свечение, то есть результат реакции +++ или ++++. Значение тира реакции от 1/80 до 1/100.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

Интенсивность реакции зависит от количества осаждённых эритроцитов на дне образованных лунок:
отрицательная реакция, которая характеризуется осаждением эритроцитов на дно лунок в виде небольшого колечка с гладкими краями или «пуговки»
+ слабая интенсивность, для данной реакции характерны небольшие одиночные отложения на дне лунки. Неагглютинированные эритроциты образовывают «маленькое колечко» в центре лунки
++ средняя интенсивность, ей свойственно образование на дне лунки «широкого плотного кольца» из неагглютинированных эритроцитов
+++ интенсивная реакция, агглютинированные эритроциты образуют так называемые «зонтики», в центре которых, явно видны кольца, образованные осевшими неагглютинированными эритроцитами
++++ резко интенсивная реакция, в которой агглютинируются все эритроциты и, образуя «зонтики», выстилают дно лунок.
Титром данной реакции считают последнее разведение сыворотки, при котором выявляется явная агглютинация эритроцитов не менее +++, то есть при интенсивной или резко интенсивной реакции.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Принцип метода заключается в своеобразном взаимодействии антитела с антигеном. Одним из обязательных условий реакции является предварительная фиксация одного из её компонентов, то есть антигена или антитела, на твёрдых планшетах. Затем, при помощи ферментной метки обнаруживают возникнувшие комплексы антиген – антитело благодаря изменению оптической плотности первоначальной смеси (субстрата), что проявляется изменением интенсивности её окраски. ИФА свойственны некоторые преимущества перед остальными серологическими методами, например, данная реакция является наиболее чувствительной, в тестах используются универсальные реагенты, остающиеся стабильными не менее 6 месяцев, автоматизированный процесс учёта результатов реакции. Набор, необходимый для проведения реакции, содержит следующие компоненты: паразитарный антиген, специфические сывороточные антитела, конъюгат, планшета с зафиксированным на ней специфическим паразитарным антигеном, контрольные сыворотки.

Постановка реакции ИФА происходит в несколько этапов: вначале производится приготовление необходимых растворов, затем готовятся исследуемые образцы сывороток, а также контрольные сыворотки, позже следует нанесение приготовленных образцов сыворотки и контрольных сывороток на твёрдофазные носители, планшеты инкубируются, промываются и, только после проведённых процедур в лунки планшет вносится конъюгат. Через некоторое время он удаляется путём промывания лунок. На завершающем этапе в лунки вносится субстратная смесь и выдерживается в тёмном месте при комнатной температуре. Оценка результатов проводится автоматически при помощи специальных измерительных приборов, в некоторых случаях допускается визуальный учёт результатов проведённой реакции.

Читайте также:  Таблетки от гастрита 15 эффективных препаратов

Достоверность и качество методов серологической диагностики зависят от организации проведённого внутреннего и внешнего лабораторного контроля, состоящих из нескольких независимых процедур, предназначенных для оценки качества результатов проведённого анализа.

Исследование серологического анализа крови

Серология-это раздел иммунобиологии, изучающий взаимоотношение антигенов и антител в сыворотке (serum) крови животных и человека. Серологический анализ крови — это современный метод анализ, проводимый для распознавания инфекционных заболеваний и нарушений работы иммунной системы организма. Проведение серологического анализа делает возможным определение причины болезни. С помощью реакций serum определяют группы крови, тестируют компоненты на совместимость перед процедурой переливания крови, контролируют эффективность вакцин. Задачей серологии является разработка и производство диагностических и лечебных сывороток.

В серологии используют следующие реакции:

  • склеивания (агглютинации);
  • осаждения (преципитации);
  • уничтожения (нейтрализации);
  • обнаружения активированных белков (связывания комплемента);
  • использование меченых антигенов или антител в крови.

Типы исследований

Многих интересует вопрос: серологический анализ крови-что это? Это диагностика заболеваний при помощи серологических реакций (seroreaction), иначе говоря, процесс взаимодействия антигенов и антител. Существует два типа исследования серум или два пути диагностики заболевания с помощью seroreaction: В первом случае к серум добавляют антиген известного болезнетворного фактора и определяют титр антител. То есть, степень готовности организма бороться с фактором, вызывающим заболевание.

Во втором случае к серум добавляют антитела для обнаружения антигена болезнетворного фактора. То есть, проник ли болезнетворный фактор в кровь пациента. Серологический анализ крови применяют в тех случаях, когда необходимо провести дифференциальную диагностику заболевания. Только в том случае, когда установлена причина патологии, врач сумеет назначить соответствующий курс лечения. Потому, что против каждого возбудителя болезни существуют специфические лекарственные средства.

Серологический анализ

Иммуноферментный анализ

Если при диагностировании заболевания поставлена цель определить количественный и качественный состав антител и антигенов, требуется провести иммуноферментный анализ (ИФА). С помощью такого анализа определяется уровень концентрации гормонов, иммуногенетических сочетаний или иных биологически активных составляющих сыворотки крови, околоплодных вод, спинномозговой жидкости, лёгочного пунктата. Все исследования проводят инвитро (in vitro), то есть вне организма, в пробирке.

Известно, что в ответ на внедрение в организм чуждых для него белоксодержащих агентов, мобилизуются иммуноглобулины. Происходит нейтрализация чужеродных белков путём образования химического соединения с протеинсодержащими антителами организма. Обнаружение таких комплексных соединений и определение их количества и является задачей иммуноферментного анализа.

Антитела представляют собой молекулы белков-иммуноглобулинов. Смысл существования антител заключается в нейтрализации болезнетворных антигенов путём синтеза из двух биологически активных молекул белков одной инактивированной.

Медицинской наукой открыто пять видов иммуноглобулинов серум. При проведении серологического анализа крови контролируют три вида. Наиболее востребован контроль за иммуноглобулином А. Он располагается на поверхности слизистых оболочек и отвечает за блокировку чуждого для организма агента.

Иммуноферментный анализ

При помощи метода ИФА не только ставят правильный диагноз, но и с высокой степенью вероятности прогнозируют процесс течения болезни.

Серологический анализ крови на вич производится анонимно методами иммуноферментного анализа. Такая же практика применяется, если необходимо обследоваться по поводу наличия или отсутствия у пациента сифилиса, туберкулёза, гепатита С.

Весьма высокоинформативным является серологический анализ крови на паразитов, который проводится методом иммуноферментного анализа. Выявляются виды паразитов, определяется интенсивность инвазии.

Серологический анализ на коклюш проводят наряду с молекулярно-генетическим и бактериологическим методами исследований. Это зависит от стадии заболевания.

Преимущества и недостатки

Сильными местами иммуноферментного анализа является диагностика патологий на ранних стадиях, проведение постоянного контроля за развитием заболевания и за динамикой результатов лечения. Время ожидания результата исследования невелико, достоверность высока, стоимость серологического анализа невелика, а в предварительной подготовке пациента к процедуре нет необходимости.

Слабым местом иммуноферментного анализа является необходимость частого контрольного тестирования крови во избежание получения ложноотрицательного результата.

Иммуноферментный анализ успешно применяется при диагностике показателей аллергий различной этиологии, инфекций вирусного происхождения, инфекций гениталий, нарушений в работе органов внутренней секреции.

Диагностические мероприятия с использованием методов иммуноферментного анализа особенно эффективны в неблагополучных по тем или иным инфекциям регионах, когда требуются решительные меры для борьбы с эпидемиями.

Преимущества и недостатки присущи всем методам исследований. Но, у ИФА крови сильных мест больше, чем слабых.

Читайте также:  Сколько времени активен · GitHub

Расшифровка

Расшифровка анализа крови проводится врачами-лаборантами и сводится к обнаружению либо положительного результата, либо его отсутствия. Например, при проведении реакции преципитации, осадок либо есть, либо его нет. Результаты анализов помогают врачам-клиницистам, ставить и уточнять диагноз болезни, назначать лечение и контролировать состояние пациента в процессе заболевания и выздоровления.

Серологические исследования подтверждают или опровергают предварительный диагноз, основанный на симптоматике. В случае подтверждения диагноза, исследования повторяют для изучения динамики титра антител, что позволяет судить о развитии или редукции заболевания.

Для здорового человека, нормальным является полное отсутствие антител. А, если таковые обнаружены, необходимы дополнительные исследования.

Серологический анализ крови: что это такое, показания, расшифровка

Серологическое исследование крови – новейший метод клиническо-лабораторной диагностики, который совершенствуется и дополняется с каждым годом. Расшифровка цито-анализов может быть готова в течение нескольких часов с момента забора крови. Результат анализов максимально точно выявит возбудителя болезни; те антитела, которые способны противостоять инфекции. Также серологическое тестирование определяет группу крови человека, сложные гормональные отклонения.

Что такое серология

Серология – это наука о физико-химических, биологических свойствах сыворотки крови. Сыворотка – плазма крови, лишенная бесцветного белка фибриногена. В академической медицине под серологией понимают в узком смысле раздел иммунологии, изучающий взаимодействие антител крови с антигенами. Основная задача серологии – приготовление специфических лечебных сывороток, которые вводят человеку и животным при обнаружении пандемического заболевания. Проверка на ВИЧ, сифилис, туляремию, краснуху возможна благодаря этому исследованию.

Самое раннее открытие и применение серологических постулатов – учение о группах, переливании крови. Научные знания о локусах и аллелях А, В и 0, дали возможность проводить гемотрансфузию по правилам совместимости доноров и реципиентов.

Читайте также

Что показывает серология

Серологические анализы распространены в педиатрии, иммунологии и эпидемиологии. Широко применяют такие исследования на выявление инфекций, передающихся половым путем. Анализ назначают при исследовании:

  • краснухи;
  • кори;
  • паротита;
  • туляремии;
  • туберкулеза;
  • брюшного тифа;
  • ветряной оспы;
  • скарлатины;
  • коклюша;
  • сифилиса;
  • хламидиоза;
  • уреаплазмоза;
  • простого герпеса;
  • вируса иммунодефицита человека;
  • токсоплазмоза;
  • вирусных гепатитов;
  • Эпштейн-Барр (мононуклеоз);
  • хеликобактер;
  • лямблии;
  • клещевого энцефалита;
  • парвовируса;
  • боррелиоза;
  • микоплазмоза;
  • бруцеллеза.

Также исследования назначают для проверки эффективности назначенного лечения. Путем диагностики сыворотки, определяют количество, активность вируса. Профилактическое рассмотрение иммуноглобулина класса IgG позволяет оценить иммунную защиту организма, реакцию гуморального ответа, готовность противостоять заражению. Такой вариант назначают перед прививкой от гепатита В.

Показания

Серологические исследования (СИ) человека проводятся еще при внутриутробном развитии, когда проверяют резус-совместимость плода, матери. Во время беременности женщина сдает ряд СИ на ИППП; те болезни, которые могут передаться эмбриону. Основными показаниями к СИ считают:

  1. Вирусные, бактериологические, инвазионные болезни.
  2. Этап течения, степень тяжести заболевания.
  3. Эффективность лечения.
  4. Гормональные нарушения.
  5. Бесплодие неясной этиологии.
  6. Аутоиммунные заболевания.
  7. Аллергии.
  8. Ревматоидный артрит под вопросом.
  9. Скрининг беременных и готовящихся к зачатию (обследование мужчин).
  10. Иммунно-реактивная готовность организма.
  11. Определение группы крови и резуса.

Сдавать СИ можно в любой государственной или частной медицинской клинике. Предпочтение нужно отдать той лаборатории, которая имеет новейшее оборудование, врачей клин-лаб диагностики, а не фельдшеров, выполняющих расшифровку.

При самообращении в медицинское учреждение, пациентам предлагают два вида серологического теста – обычный и экспресс-метод. В таком случае можно выбрать стандартное исследование, так как знаниями о необходимости ускоренного варианта обладают только врачи. В некоторых случаях быстрый метод малоинформативен.

Исследование сыворотки в обязательном порядке назначают потенциальным донорам крови при обращении в центр переливания. Микрореакция на сифилис проводится очень быстро, в течение 2-3 минут; другие тесты делают чуть дольше 15-20 минут.

Подготовка к анализу

По скольку спектр серодиагностики инфекционных заболеваний очень разнообразен, на каждый случай составляют индивидуальный план подготовки. Основные принципы, которые применимы к приготовлению перед медицинскими манипуляциями:

  • не есть за 10-14 часов до сдачи анализа;
  • за 1-2 дня исключить прием жирной пищи и алкоголя;
  • не принимать медицинские препараты (витамины в том числе);
  • избегать стрессовых ситуаций и переживаний;
  • не курить за 3 суток до сдачи крови;
  • сдавать анализ утром на тощак;
  • проводить любые другие манипуляции, вмешательства после СИ.

Если нельзя отменить прием лекарств, например, пероральных контрацептивов, статинов, инсулина, то нужно предоставить врачу и лаборанту полный список принимаемых средств.

Методы проведения СИ

Серологические анализы подразделяются на количественные и качественные. Качественные дают однозначный ответ о наличии или отсутствии в организме антител (Ат), антигенов (Аг). Количественные результаты отображаются в виде чисел со знаками + в количестве от 1 до 4. Самые распространенные в современной медицине методы СИ:

  1. Агглютинация. Основана на принципе связывания Ат, Аг; что дает выпадение хлопьеобразного осадка в сыворотке.
  2. Гемагглютинация. Применяются адсорбированные эритроциты.
  3. Преципитация. Образование помутнения от связки Аг с Ат.
  4. Коагглютинация. Выявление негативных антигенов при сывороточном введение антител, широко распространена адсорбция на белке стафилококка.
  5. Подавление гемагглютинации. Подавление соединительной функции Аг со свободными эритроцитами.
  6. Непрямая реакция Кумбса. Определение антител к антигенам эритроцитов.
  7. Кольцепреципитация. Наслоение антигенов на лечебную сыворотку.
  8. Двойная радиальная иммунодиффузия. Проникновение антигенов в лунки агар-агар питательной среды, растворенной в сыворотке
  9. Реакция связывания комплемента. Индикатор – эритроциты барана в гемолитической сыворотке, который сигнализирует о смешивании предполагаемых Аг и Ат иммунитета.
  10. Нейтрализация вирусов родными антителами.
  11. Маркирование Ат и Аг флуоресцентным или ферментным составом. Иммунофлюоресцентный РИФ, иммуноферментный ИФА методы.
Читайте также:  ЭРХПГ ЭПСТ, литоэкстракция из; панкреатического протока и; (или) ампуллэктомия и; (или) вмешательств

В сложных случаях – неясной клинической картине, высокой пандемичности и молниеносном распространении инфекции, специалистами лаборатории может быть принято решение о проверке одного показателя несколькими разными методами.

Серологический анализ крови является инструментом подтверждения или опровержения диагноза, но никак не способом первичной постановки.

Норма референтных показателей для каждого из методов подбирается индивидуально, зависит от пола, возраста, физиологического состояния больного. обследуемой болезни.

Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы

Антитела, помеченные светящимся раствором, вводятся в сыворотку. В качестве меток чаще всего применяют флуороционат, который придает клеткам зеленое свечение под ультрафиолетовой лампой. Результат анализа качественный, базируется на яркости свечения. РИФ проводят прямым, непрямым методами, при котором сначала вводят обычные АТ, а затем маркированные для избежания неспецифической реакции цепи.

Метод ИФА основан на выявлении антител, антигенов путем маркирования ферментом какой-либо клетки. В результате химических реакций образуются окрашивания сыворотки в зависимости от того, есть ли злокачественные Аг и какие именно. В свою очередь, ИФА подразделяется на гомогенный и гетерогенны способ. Гомогенно исследуют в жидком растворе, а гетерогенно на твердой основе.

Расшифровка

В расшифровке на первом месте стоит приставка Anti, после которой следуют буквы T или G, что указывает на антитела или антигены. Ранние и поздние тела возбудителя болезни указываются как M и G соответсвенно. Например, анализ на гепатит на ранние антитела выглядет как Аnti-НАV IgМ, поздние Аnti-НАV IgG. Цифры со знаками + указывают на количество обнаруженых тел. Например, Аnti-НАV IgМ +11 и Аnti-НАV IgG +++ 1000 означает, что человек переболел гепатитом ранее, на данный момент воспалительного процесса в организме нет. HВsAg антиген, показывающий наличие заболевания. Аnti-НВе – признак вялотекущей формы гепатита.

По группам крови иная расшифровка – А, В и 0. 0 (+) – первая положительная группа крови, 0 (-) первая отрицательная. А0 и АА втораяя группа, ВВ и В0 третья, АВ четвертая. Знак + положительный резус, – отрицательный. При исследовании крови матери и эмбриона, результаты матери пишут первыми, через дробную черту плода. Если обнаружен резус конфликт, то в конце ставят три восклицательных знака.

Преимущества серологии

Высокая чувствительность к возбудителям инфекции сделали серологические анализы самыми востребованными по всей планете. Обширный перечень определяемых антигенов пополняется с каждым годом, что совершенствует серологию, обновляет ее поисковый список. Быстрая исполнительность анализов – от 2 минут, позволяет максимально рано определить причину болезни. Для постановки диагноза достаточна маленькая доза крови – до 10 мл. Возможность мониторинга течения заболевания делают СИ способом дополнительного обследования во время лечения.

Минусов серологические исследования практически не имеют. На данный момент перечень исследований ограничен базой антител и антигенов, которые открыты наукой и изучены. Новые вспышки вирусных болезней пополняют объекты наблюдения эпидемиологов, инфекционистов, поэтому появление очередного вида вируса только способствует развитию серологии.

Существенная сложность, отличающая серологические анализы, это высокие требования к лаборантам и врачам-вирусологам. От исполнителя анализа требуется внимательность и точность при совершении реакций и подсчете результатов. А ученые должны точно описать и исследовать свойства и характерные особенности изучаемых объектов, на основании которых построить алгоритм для младшего медицинского персонала.

Читайте также

Серологические исследования – это новейший метод изучения сыворотки крови, направленный на выявление специфичных антител и антигенов. СИ рассматривают широкий перечень исследуемых возбудителей, передающихся воздушно-капельным, урогенитальным, гематологическим путем. Серологические анализы могут быть выполнены в кратчайшие сроки и представить в расшифровке не только идентифицированного возбудителя, но и наиболее эффективное лечение. СИ также позволяют наблюдать за течением заболевания и определять его тяжесть. Серология широко используется для определения группы крови, резус-фактора, гормональных сбоев, аллергий.

Ссылка на основную публикацию
Сенча Александр Викторович– врач Гастроэнтеролог, Терапевт, Семейный врач
Сенча Александр Викторович Гастроэнтеролог', 'Терапевт', 'Семейный врач Стоимость приёма от 6695р. Гастроэнтеролог, Терапевт, Семейный врач Стоимость приёма от 6695р. Врач-гастроэнтеролог....
Сексуальный фетишизм — Википедия
Кто такие люди-фетишисты и в чем проявляется их увлечение? Слово «фетишизм» стало на слуху у многих. Активно обсуждаются моральные и...
Селедка польза и вред для здоровья
Чем полезна селедка Сегодня на повестке нашего обсуждения вопрос: селедка, польза и вред для организма этой рыбки, весьма почитаемой в...
Сепсис (заражение крови) причины, симптомы, осложнения, диагностика, лечение сепсиса
Что такое сепсис? «Сепсис» – один из терминов, используемых для описания заражения крови. Это потенциально опасная для жизни инфекция, вызванная...
Adblock detector